rna提取注意事项(rna提取)
2023-10-20 09:55:03
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导读 大家好,我是小曜,我来为大家解答以上问题。rna提取注意事项,rna提取很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1.提取称取鲜酵母 159或...
大家好,我是小曜,我来为大家解答以上问题。rna提取注意事项,rna提取很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1.提取
称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh。
2.分离
将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离。
3.沉淀RNA
将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却.待冷至10℃以下时,用6mol/L HCI 小心地调节pH值至2.0~2.5(注意严格控制pH)。调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大。
4.洗涤和抽滤
上述悬浮液以 4000r/min离心 10min,得到 RNA沉淀。将沉淀物放在 10ml小烧杯内,用95%的乙醇 5~10ml充分搅拌洗涤,然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤,再用 95%乙醇5~10ml淋洗 3次。
5.干燥
从布氏漏斗上取下沉淀物,放在6cm表面皿上,铺成薄层,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA制品称重,存放于干燥器内。
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。
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