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甲基咪唑的测定(薄层法) 4.6.1 试剂与溶液 4.6.1.1 三氯甲烷-无水乙醇混合溶液(8:2)。 4.6.1.2 碳酸钠(HGB 1293),10％溶液。 4.6.1.3 硫酸(GB/T625),0.05mol/L溶液。 4.6.1.4 硅胶(GF 254)(薄层层析用)。 4.6.1.5 碳酸氢钠(GB/T640)。 4.6.1.6 碳酸氢钠(GB/T640),8％溶液。 4.6.1.7 展开剂〔乙醚-三氯甲烷-甲醇(8:2:2)〕。 4.6.1.8 显色剂

A:0.5％对氨基苯磺酸的2％盐酸溶液 ；

B:0.5％亚硝酸钠溶液。

A与B临用前等量混合。 4.6.1.9 4-甲基咪唑标准溶液

称取 样品4-甲基咪唑（精确至0.100 0g）置于100mL容量瓶中,加95％乙醇定容至刻度,此液每 1mL相当于1.0mg 4-甲基咪唑。

临用前再用95％乙醇稀释成每1mL相当于0.1mg的4-甲基咪唑标准液。 4.6.2 方法步骤 4.6.2.1 提取

称取样品5g(准确至0.01g)加15mL水溶解,加10％碳酸钠15mL,于250mL 分液漏斗中,加三氯甲烷-无水乙醇混合溶液80mL,剧烈振摇4min～5min,待完全分层后,将三氯甲烷-无水乙醇提取液收集于250mL具塞三角瓶中,上述水层再用三氯甲烷-无水乙醇混合溶液70mL提取一次,合并提取液。提取液中加入0.05mol/L硫酸20mL,剧烈振摇60次,分取水层,此液于60～70℃水浴上浓缩至2mL～3mL,缓缓加入碳酸氢钠细粉约0.2g,使不产生气泡为止,用乙醇定容到5mL。 4.6.2.2 制板

称取硅胶(GF 254)3g,加80％碳酸氢钠溶液1mL,蒸馏水6mL,混匀涂于125mm×85mm薄玻璃片上,在空气中自然干燥,再放入烘箱120℃干燥2min,取出后放入干燥器备用。 4.6.2.3 点样

将4-甲基咪唑标准液10μL、20μL、30μL及样品稀释液100μL分别点在 薄板上。

将薄 板在展开剂中展至溶液前沿达10cm,取出薄板,吹干后用新配的显色剂进行喷雾,在5～10min内，4-甲基咪唑的黄色斑点可达最深度,并稳定数小时,根据斑点大小和颜色的深浅与标准斑点比较,确定样品中4-甲基咪唑的含量。 4.6.3 分析结果的表述 　　　　　　 C X3＝━━━━━━━━━━━×100×0.1/A610……………………(3) 　　　　　 V1 　　　　 m×━×1 000×1 000 　　　　　　 V2 式中:X3--4-甲基咪唑的含量,％；C--样品斑点相当于标准斑点的量,μg；m--样品质量,g；V1--点样的体积,μL;V2--样品溶液的总体积,μL；A610--样品在610nm处的吸光度；0.1/A610--折算成色度为0.1时的 含量

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